微生物檢測公司- 武漢世紀(jì)久海公司(圖)

（4）需用特殊方法制備供試液的供試品
膜劑供試品 取供試品，剪碎，加ph7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，或ph7.2*鹽緩沖液，或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，浸泡，振搖，制成1：10的供試液。若需要，調(diào)節(jié)供試液ph值至6～8。必要時，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。
腸溶及結(jié)腸溶制劑供試品 取供試品，微生物檢測公司，加入ph6.8無菌*鹽緩沖液（用于腸溶制劑）或ph7.6 無菌*鹽緩沖液（用于結(jié)腸溶制劑），置45℃水浴中，振搖，使溶解，制成1：10的供試液。必要時，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。
氣霧劑、噴霧劑供試品 取供試品，置-20℃或其他適宜溫度冷凍約1小時，取出，迅速消毒供試品開啟部位，用無菌鋼錐在該部位鉆一小孔，放至室溫，并輕輕轉(zhuǎn)動容器，使拋射劑緩緩全部釋出。供試品亦可采用其他適宜的方法取出。用無菌zhu射器從每一容器中吸出藥液于無菌容器中混合，然后取樣檢查。
貼膏劑供試品 取供試品，去掉防粘層，將粘貼面朝上放置在無菌玻璃或塑料器皿上，在粘貼面上覆蓋一層適宜的無菌多孔材料（如無菌紗布），避免貼膏劑粘貼在一起。將處理后的貼膏劑放入盛有適宜體積并含有表面活性劑（如聚山梨酯80或卵磷脂）稀釋液的容器中，振蕩至少30分鐘。必要時，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。
各品種項下規(guī)定的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)解釋如下：
10^1cfu：可接受的*大菌數(shù)為20；
10^2cfu：可接受的*大菌數(shù)為200；
10^3cfu：可接受的*大菌數(shù)為2000，依此類推。
若供試品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)的檢查結(jié)果均符合該品種項下的規(guī)定，判供試品符合規(guī)定；若其中任何一項不符合該品種項下的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定。
稀釋液、沖洗液及培養(yǎng)基
見非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法（通則1106）。
含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物(mixed culture)。如果在一個菌落中所有細(xì)胞均來自于一個親代細(xì)胞，那么這個菌落稱為純培養(yǎng)(pureculture)。在進(jìn)行junzhong鑒定時，所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。得到純培養(yǎng)的過程稱為分離純化，方法有許多種。
1、傾注平板法
首先把微生物懸液通過一系列稀釋，取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40-50℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合，然后把這混合液傾注到無菌的培養(yǎng)皿中，待凝固之后，把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。單一細(xì)胞經(jīng)過多次增殖后形成一個菌落，取單個菌落制成懸液，重復(fù)上述步驟數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)物。
2、涂布平板法
首先把微生物懸液通過適當(dāng)?shù)南♂專∫欢康南♂屢悍旁跓o菌的已經(jīng)凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上，然后用無菌的玻璃guadao把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上，經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個菌落。
3、平板劃線法
*簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無菌的接種環(huán)取培養(yǎng)物少許在平板上進(jìn)行劃線。劃線的方法很多，常見的比較容易出現(xiàn)單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、fangshe法、四格法等。當(dāng)接種環(huán)在培養(yǎng)基表面上往后移動時，接種環(huán)上的菌液逐漸稀釋，后在所劃的線上分散著單個細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)，每一個細(xì)胞長成一個菌落。
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