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微透析在腦科學中的應用
腦部微透析是利用微透析技術對特定腦部區域進行連續灌注采樣,用于動態監測動物大腦內源性和外源性物質細胞外含量的變化的新技術。該技術常與電化學檢測、熒光、測定等系統聯合,對離子、單胺類、氨基酸*遞質、能量物質等物質進行細胞內外物質的濃度變化監測。由于具有連續取樣、動態觀察、定量分析、采樣量小等特點,在*科學的領域中已獲得越來越廣泛的應用。微透析系統結合電生理、光遺傳、行為學等研究手段同時檢測,同步地不同數據進行記錄分析。
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微透析系統
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目前測定回收率的方法主要有以下幾種:1,外標法計算被測物質相對濃度的變化時, 可簡單地采用體外回收率法。測定宜在取樣后立即進行, 將探針放入已知濃度的標準溶液中, 用與體內實驗相同的流速灌流探針。達到穩定狀態后收集灌流液并進行檢測。測定濃度與標準溶液濃度之比就是體外回收率。此法雖簡單易行, 但由于被測物質在體外時與體內的環境狀況不同, 檢測結果不能嚴格地等同于實際的回收率。2,內標法往灌流液中加入已知濃度且性質與被分析物質相似的另一種物質做內標,瑞典微透析系統經銷商,內標物不僅在擴散性質上與被分析物一致,而且還要在體內的代謝過程中也盡可能一致,測出透析率即作為被分析物的回收率。由于選擇內標的局限性很大, 限制了此法的應用。3,反透析法假設被測物從兩個方向通過半透膜是同等的。在灌流液中加入一定濃度的內標物(cic) ,動物微透析系統經銷商,在與體內透析相同的條件下操作, 測定透析液中內標物的濃度(cec) ,體內回收率(rin ,vivo ) 可用下式計算:rin vivo = (1 cec/ cic) ×100 %本法要求內標物具有生物惰性, 盡可能與被測物相似。
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微透析探針是微透析實驗中重要的組成部分。所有cma的探針除了線性探針之外,cma微透析系統經銷商,都是采用同心圓的結構來制作的。探針兩個端口,入口端和出口端。一個內部的導管能使灌流液從探針的入口端直接流到探針的頂端,隨之灌流液則會充滿半透膜和導管之間的區域,之后灌流液繼續沿著外管從出口流出。探針的所有金屬部分都經過預處理以防止灌流液中的易變成分發生氧化。
清醒的動物在做cns的微透析實驗時,在植入探針之前需要在動物醉狀態下先植入-個套管,等大鼠清醒要插入探針時,可以把套管中的假探針拔出,再插入*的探針開始實驗,這樣就不用在動物手術時就植入探針,保證探針的使用效率。
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