磁珠分選純化試劑盒推廣應(yīng)用

基于 spri(solid phase reversible immobilization ) 技術(shù)，在磁珠法反應(yīng)體系中，核酸分子（dna & rna）會由線性壓縮成球狀， dna 在一定濃度的 peg 存在條件下，nacl 或 mgcl2 促進條件下，dna 分子構(gòu)象會發(fā)生急劇變化，會暴露出磷酸骨架上大量的帶負電荷的磷酸基團，與表面帶負電荷的羧基-cooh 磁珠結(jié)合。目前認為這種負負電荷間的作用是由于帶正電荷的鹽離子的作用（如 na+）。帶負電磷酸基團借由解離的鹽離子（如 na+）與羧基形成「陰離子-陽離子-陰離子」的鹽橋結(jié)構(gòu)，使 dna 被特異性吸附到羧基磁珠表面。而當(dāng)反應(yīng)緩沖液被棄除后，加入水性分子，會快速充分水化核酸分子，解除三者之間的離子相互作用，使吸附到磁珠上的核酸分子被純化出來。利用磁珠的磁性，可通過外加磁場進行收集。
受益于高通量測序技術(shù)的發(fā)展，磁珠也憑借其高通量，適用于自動化的特點備受推崇，廣泛用于 ngs 文庫構(gòu)建中的 dna 提取純化及雙輪分選（片篩）。
dna 提取純化的目的在于去除不想要的片段、回收需要的片段。由于磁珠**吸附大片段，因而可通過一定比例的磁珠吸附特定大小以上的片段，丟棄上清（去除非目標片段）后將磁珠吸附的 dna 洗脫回收。
dna 雙輪分選（片篩）目的在于從片段中選擇特定區(qū)域的 dna 片段大小。由于磁珠**吸附大片段，因而需通過兩輪磁珠操作進行分選。
兔牙生物科技研發(fā)的 bunnymagtm 磁珠分選純化試劑盒中的磁珠，與市面上大部分的磁珠類似，
磁珠結(jié)構(gòu)（分為 3 層）：
? 較內(nèi)層的**是 polystyrene，ps
? *二層包裹磁性物質(zhì)——四氧化三鐵（fe3o4）
? 較外層表面是羧基（-cooh）修飾的高分子材料
磁珠體系主要包括磁珠、聚乙二醇（peg）、鹽離子（nacl）
兔牙科技 bunnymagtm 磁珠的優(yōu)勢：
（1）樣本需求量低：微量的材料即可提到高濃度的核酸；
（2）操作簡單快速：整個操作流程基本分為五步（裂解、結(jié)合、洗滌、干燥、洗脫），全程*離心操作，大多可在 30～60 分鐘內(nèi)完成；
（3）質(zhì)量穩(wěn)定可靠：游離的磁珠與核酸的結(jié)合量較大，特異性的結(jié)合使得核酸純度較高，且可通過控制磁珠表面基團來調(diào)節(jié)核酸回收量；
（4）全自動化操作：采用核酸提取儀可實現(xiàn)自動化、高通量操作，可實現(xiàn)幾十甚至幾百個樣品的提取；
（5）安全無毒無害：試劑不含酚等有毒化學(xué)試劑，完全符合現(xiàn)代化環(huán)保理念。
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